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包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。
天然抗原可取自動物組織、微生物培養(yǎng)物等,須經提取純化才能作包被用。
HBsAg可以從攜帶者的血清中提取,一般的細菌和病毒抗原可以從其培養(yǎng)物中提取,蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中提取等。
重組抗原是抗原基因在質粒體中表達的蛋白質抗原,多以大腸桿菌或酵母菌為質粒體。重組抗原的優(yōu)點是除工程菌成份外,其他雜質少,而且無傳染性,但純化技術難度較大。以大腸桿菌為質粒體的重組抗原如不能充分除大腸桿菌成份,用于ELISA試劑盒,在反應中可出現(xiàn)假陽性,因不少受檢者受大腸桿菌感染而在血清中存在抗大腸桿菌抗體。
重組抗原的另一特點是能用基因工程制備某些無法從天然材料中分離的抗原物質。目前檢測抗HCVELISA中所用包被抗原大多為根據HCV的基因克隆表達而制備的重組抗原。
在傳染病診斷中,不少重組抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在ELISA中取得應用。合成多肽抗原是根據蛋白質抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。
一種蛋白質抗原往往含有多個不同的能引起抗體產生的決定簇,因此在受檢血清中的其他抗體就不能與該多肽抗原發(fā)生反應。另外,某些微生物發(fā)生變異時往往發(fā)生抗原結構變化,在這種情況下,用個別多肽抗原進行包被可引起其他抗體的漏檢。