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PCT抗體識(shí)別位點(diǎn)

2021-03-29 16:21
CT抗體特異識(shí)別位點(diǎn)為PCT抗原序列中的降鈣素部分,識(shí)別位點(diǎn)如下圖所示:
PCT抗體識(shí)別位點(diǎn)圖1:PCT抗體識(shí)別位點(diǎn)

膠體金平臺(tái)

利用K3b8制備膠體金試紙條,利用PCT膠體金試紙條分別對(duì)28ng/ml,15ng/ml,8ng/ml,1ng/ml,0.2ng/ml等濃度的臨床血清樣本進(jìn)行檢測(cè),T線(xiàn)顏色變化明顯,呈梯度變化。
南京歐凱生物的降鈣素原(PCT)抗體在膠體金平臺(tái)驗(yàn)證分析圖圖2:K3b8膠體金試紙條
臨床對(duì)比分析
利用K3b8制備膠體金試紙條,使用PCT膠體金試紙條測(cè)羅氏賦值血清樣本(30例,濃度范圍0.05-100ng/ml)進(jìn)行對(duì)比分析,如圖3,樣本符合率R2>98%。
K58w3-K3b8膠體金平臺(tái)樣本符合率


圖3:K3b8膠體金平臺(tái)樣本符合率

免疫熒光平臺(tái)

臨床對(duì)比分析
以K3b8配對(duì)抗體對(duì)制備免疫熒光試紙條,利用PCT免疫熒光試紙條檢測(cè)羅氏賦值血清樣本(30例,濃度范圍0.05-100ng/ml)進(jìn)行對(duì)比分析,如圖4,樣本符合率R2>98%。
K58w3-K3b8免疫熒光平臺(tái)樣本符合率


圖4:K58w3-K3b8免疫熒光平臺(tái)樣本符合率

準(zhǔn)確性
將降鈣素原濃度為的5ng/ml-50ng/ml和0.4ng/ml-4ng/ml兩水平的質(zhì)控品當(dāng)做樣本,對(duì)每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次,計(jì)算每個(gè)樣品測(cè)定結(jié)果的均值,記為M,并根據(jù)公式B=(M-T)/T×100%(B為相對(duì)偏差;M為測(cè)量濃度均值;T為標(biāo)定濃度)計(jì)算相對(duì)偏差,相對(duì)偏差應(yīng)不大于15%。

樣本
(ng/ml)
測(cè)定1測(cè)定2測(cè)定3平均值
(ng/ml)
相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)要求
批次11.021.151.110.961.074.90%±15%
10.259.929.939.449.76-4.78%
批次21.020.961.060.991.00-1.96%
10.258.9411.698.809.81-4.29%
批次31.020.911.160.971.01-0.98%
10.2511.2210.1910.8810.764.98%

表1:K58w3-K3b8免疫熒光平臺(tái)準(zhǔn)確性

重復(fù)性
用降鈣素原濃度為5ng/ml-50ng/ml和0.4ng/ml-4ng/ml的兩個(gè)水平的質(zhì)控品為樣本,重復(fù)測(cè)定各10次, 計(jì)算測(cè)量值的平均值(平均數(shù))和標(biāo)準(zhǔn)差(s)。按公式CV=(S /平均數(shù))×100%,計(jì)算變異系數(shù)(CV),結(jié)果應(yīng)不大于15%。

低值樣本
(1.02ng/ml)
高值樣本
(10.25ng/ml)

測(cè)定11.0011.15
測(cè)定21.028.86
測(cè)定30.8711.67
測(cè)定41.0810.46
測(cè)定51.039.97
測(cè)定61.0911.40
測(cè)定70.9811.29
測(cè)定81.0110.36
測(cè)定90.9811.65
測(cè)定101.0510.49
平均值(ng/ml)1.0110.73
SD0.0620.883
CV6.14%8.23%
標(biāo)準(zhǔn)要求±15%

表2:K58w3-K3b8免疫熒光平臺(tái)重復(fù)性